Ogród Botaniczny Uniwersytetu Karola w Pradze prowadzi ekspozycje zewnętrzne oraz gromadzi rośliny w szklarniach. Wystawa zewnętrzna liczy ok. 3000 gatunków roślin i przedstawia florę środkowoeuropejską. Ekspozycje szklarniowe prezentują stałą ekspozycją roślin tropikalnych i subtropikalnych, m.in. kaktusów, palm i cytrusów.
Ogród ma powierzchnię 3,5 ha. Mieszczą się tu ekspozycje poświęcone roślinności pochodzącej ze wszystkich kontynentów. Ogród Botaniczny Uniwersytetu Karola został założony przez Josefa Bohumíra Mikana w 1775 roku w Smíchowie na terenach dawnego ogrodu jezuickiego. Po powodzi w 1890 roku ogród botaniczny przeniósł się do Nowego Miasta w Pradze.
Wówczas ogród został podzielony na część czeską oraz niemiecką. W czasie II wojny światowej czeska część ogrodu została włączona do niemieckiej. Pod koniec wojny, w czasie nalotu wojsk alianckich ogród został zniszczony. Czeskie szklarnie odbudowywano tuż po wojnie, część niemiecką poddano renowacji znacznie później.